{"id":42957,"date":"2023-07-03T09:43:39","date_gmt":"2023-07-03T12:43:39","guid":{"rendered":"https:\/\/jornalfatosenoticias.com.br\/?p=42957"},"modified":"2023-07-03T09:43:41","modified_gmt":"2023-07-03T12:43:41","slug":"tecnica-inovadora-acelera-o-estudo-de-proteinas-de-dificil-acesso-na-celula","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/jornalfatosenoticias.com.br\/index.php\/2023\/07\/03\/tecnica-inovadora-acelera-o-estudo-de-proteinas-de-dificil-acesso-na-celula\/","title":{"rendered":"T\u00e9cnica inovadora acelera o estudo de prote\u00ednas de dif\u00edcil acesso na c\u00e9lula"},"content":{"rendered":"\n

Por Ag\u00eancia Fapesp<\/a><\/strong><\/span><\/em><\/p>\n\n\n\n

\"\"<\/figure><\/div>\n\n\n\n

Estudo conduzido na Universidade Estadual de Campinas (Unicamp) e publicado<\/a><\/strong>\u00a0no\u00a0Journal of Biological Chemistry<\/em> pode facilitar a busca de novos medicamentos para tratar doen\u00e7as como, por exemplo, a mucolipidose tipo 4 \u2014 condi\u00e7\u00e3o rara, mais prevalente na popula\u00e7\u00e3o judaica e que provoca atraso psicomotor, defici\u00eancia visual e graves problemas digestivos.
Esse tipo de enfermidade est\u00e1 relacionado com a disfun\u00e7\u00e3o de prote\u00ednas existentes na membrana de organelas \u2014 as estruturas internas das c\u00e9lulas. E, ao testar candidatos a f\u00e1rmacos em laborat\u00f3rio, os compostos precisam cruzar uma s\u00e9rie de barreiras at\u00e9 atingir o alvo: a membrana externa da c\u00e9lula, seguida pelo citoplasma e, finalmente, a membrana da organela.<\/p>\n\n\n\n

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No caso da mucolipidose tipo 4 o alvo \u00e9 a prote\u00edna TRPML1, localizada na membrana do lisossomo \u2014 pequena organela em forma de ves\u00edcula que tem a capacidade de degradar e expelir part\u00edculas para fora da c\u00e9lula. Essa prote\u00edna forma estruturas conhecidas como canais i\u00f4nicos, que regulam a entrada e a sa\u00edda de \u00edons da c\u00e9lula ou das organelas. A altera\u00e7\u00e3o na fun\u00e7\u00e3o de TRPML1 tamb\u00e9m est\u00e1 associada ao avan\u00e7o de tumores e \u00e0 maior suscetibilidade \u00e0 \u00falcera p\u00e9ptica.<\/p>\n\n\n\n

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Outro desafio \u00e9 isolar essas prote\u00ednas de membrana para estudo, por isso temos que estud\u00e1-las em c\u00e9lula viva, em tempo real\u201d, explica Micael Cunha<\/a><\/strong>, pesquisador do\u00a0Centro de Qu\u00edmica Medicinal<\/a><\/strong>\u00a0(CQMED<\/a><\/strong>) da Unicamp e primeiro autor do artigo.<\/span><\/p><\/blockquote>\n\n\n\n

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Um agravante no estudo dos lisossomos \u00e9 que essas estruturas s\u00e3o pequenas quando comparadas \u00e0 c\u00e9lula como um todo e os compostos que est\u00e3o sendo testados precisam ser capazes de encontr\u00e1-las, relata Cunha, que \u00e9 bolsista de p\u00f3s-doutorado<\/a><\/strong> da Fapesp. \u201cSe a c\u00e9lula fosse uma casa, o lisossomo seria uma poltrona na sala de estar\u201d, compara.<\/p>\n\n\n\n

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Para estudar essa prote\u00edna de membrana do lisossomo, o principal desafio era saber se o composto que est\u00e1vamos testando tinha de fato alcan\u00e7ado o alvo [TRPML1]\u201d, acrescenta Rafael Cou\u00f1ago<\/a><\/strong>, pesquisador principal do CQMED e coautor do artigo.<\/span><\/p><\/blockquote>\n\n\n\n

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At\u00e9 ent\u00e3o, cientistas que se debru\u00e7aram no estudo de prote\u00ednas de membrana basicamente se apoiaram em duas metodologias. Uma que oferece resultados limitados e outra cuja prepara\u00e7\u00e3o \u00e9 muito custosa e demorada.
Diante desse cen\u00e1rio, a equipe do CQMED resolveu testar a metodologia chamada BRET (sigla em ingl\u00eas para transfer\u00eancia de energia por resson\u00e2ncia de bioluminesc\u00eancia), que j\u00e1 havia sido empregada com sucesso em bact\u00e9rias, para a busca de novos antibi\u00f3ticos (leia mais em:\u00a0agencia.fapesp.br\/39096\/<\/a><\/strong><\/em>).<\/p>\n\n\n\n

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Caminho abreviado
<\/span><\/strong>A metodologia BRET basicamente consiste em criar um sistema de fluoresc\u00eancia na c\u00e9lula que s\u00f3 funciona se o composto em teste estiver ligado na regi\u00e3o correta da prote\u00edna.<\/p>\n\n\n\n

Desenvolvemos uma mol\u00e9cula fluorescente baseada em um composto que reconhecidamente se liga \u00e0 prote\u00edna-alvo. E \u00e0 TRPML1 adicionamos uma segunda prote\u00edna que emite luz azul. Quando as mol\u00e9culas est\u00e3o juntas, o sistema \u2018acende\u201d\u2018, explica Cunha.<\/span><\/p><\/blockquote>\n\n\n\n

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\u201cN\u00e3o t\u00ednhamos certeza de que daria certo, pois at\u00e9 o momento nenhum laborat\u00f3rio havia produzido um sistema de BRET para canais i\u00f4nicos, como TRPML1. Al\u00e9m disso, essas prote\u00ednas s\u00e3o muito dif\u00edceis de serem alcan\u00e7adas na c\u00e9lula. Testamos e os resultados foram muito promissores\u201d, complementa Cunha. \u201cIsto pode abreviar v\u00e1rias etapas na busca de novos compostos, pois j\u00e1 sabemos se o experimento funciona dentro de um sistema vivo, ainda que simplificado, como uma c\u00e9lula\u201d, diz Cou\u00f1ago.<\/p>\n\n\n\n

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Al\u00e9m da vantagem de j\u00e1 testar o comportamento do composto em c\u00e9lulas vivas, o uso da metodologia para estudar TRPML1 mostra a rela\u00e7\u00e3o entre a concentra\u00e7\u00e3o do composto e o tempo que ele ficou ligado \u00e0 prote\u00edna. \u201cEsse tipo de informa\u00e7\u00e3o ajuda a selecionar a mol\u00e9cula que fica mais tempo acoplada e, futuramente, ajudar\u00e1 a definir as doses necess\u00e1rias para o efeito do medicamento\u201d, explica Cunha.<\/p>\n\n\n\n

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Como n\u00f3s testamos muitos compostos em paralelo, essa metodologia ajuda a priorizar as mol\u00e9culas que s\u00e3o fortes candidatas a seguir para os estudos pr\u00e9-cl\u00ednico\u201d, informa Katlin Massirer<\/a><\/strong>, pesquisadora do Centro de Biologia e Engenharia Gen\u00e9tica (CBMEG-Unicamp), coordenadora do CQMED e supervisora de Cunha. \u201cOs resultados significam um poss\u00edvel avan\u00e7o para a busca de compostos que podem, futuramente, tratar pessoas com disfun\u00e7\u00f5es lisossomais\u201d, complementa a pesquisadora.<\/span><\/p><\/blockquote>\n\n\n\n

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Com o avan\u00e7o no estudo da TRPML1, os pesquisadores preveem o uso combinado da t\u00e9cnica de BRET com outra recentemente desenvolvida para o estudo de canais de membrana chamada de indicadores de c\u00e1lcio geneticamente codificados. \u201cEnquanto a BRET indica o tempo que o composto ficou acoplado, a outra indica a pot\u00eancia dessa liga\u00e7\u00e3o\u201d, informa Cunha.
Uma vez escolhidos os melhores compostos com atividade na c\u00e9lula, eles s\u00e3o submetidos a testes de laborat\u00f3rio cada vez mais complexos, como ensaio animal e depois com humanos, que podem levar de oito a dez anos e custar centenas de milhares de d\u00f3lares.<\/p>\n\n\n\n

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\u00c9 um grande funil de sele\u00e7\u00e3o de mol\u00e9culas e muito poucas chegam \u00e0 prateleira da farm\u00e1cia. Por isso, todas as formas de acelerar essa busca inicial s\u00e3o sempre muito bem-vindas\u201d, conclui Massirer.<\/span><\/p><\/blockquote>\n\n\n\n

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O artigo\u00a0A novel BRET-based assay to investigate binding and residence time\u00a0of unmodified ligands to the human lysosomal ion channel TRPML1 in intact cells<\/em>\u00a0pode ser lido em:\u00a0www.sciencedirect.com\/science\/article\/pii\/S0021925823018355?via%3Dihub<\/a><\/strong>.<\/p>\n\n\n\n

Fonte: GizModo<\/a><\/em><\/strong><\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

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